Rabia transmitdaa por murciélagos enBBrasil / Rabies Transmitted by Bats in Brazil

Frente al desafío que la rabia representa para la industria pecuaria y la salud pública en América Latina, el presente artículo tiene como objetivo hacer una revisión de literatura amplia y crítica sobre la epidemiología de la rabia transmitida por murciélagos en Brasil. El tema es abordado inicialmente desde una perspectiva histórica hasta la caracterización molecular de aislamientos del virus, para finalmente contrastar con la situación de otros países de las Américas. La información referente a Brasil es presentada de manera separada debido a la gran abundancia de especies de murciélagos de diversos hábitos alimenticios, implicadas en la transmisión del virus de la rabia y las complejas relaciones entre los ciclos epidemiológicos revelados por estudios de tipificación antigénica y análisis filogenético, lo cual ha permitido reconocer con más nitidez, la importancia de los quirópteros como reservorios y transmisores de esta enfermedad. Este nuevo escenario epidemiológico exige reexaminar las medidas de control aplicadas hasta el momento, desde un abordaje multidisciplinar, así como cooperación intersectorial y participación por parte de la comunidad.

Considering that rabies represents a challenge for the livestock industry and public health in Latin America, this article is intended to do a comprehensive and critical literature review on the epidemiology of rabies transmitted by bats in Brazil. The subject is addressed from a historical perspective to molecular characterization of rabies virus isolates and finally making a contrast with other countries of the Americas. Information concerning Brazil is presented separately because of the abundance of bats species with different feeding habits, involved in the transmission of rabies virus and the complex relationships between epidemiological cycles in this country, which have been disclosed by antigenic typing and phylogenetic analysis. This has allowed to recognize more clearly the importance of bats as reservoirs and transmitters of this disease. This new epidemiological scenario requires reappraising current control measures, using a multidisciplinary approach, intersectoral cooperation and community participation.

Genetic characterization of rabies virus isolated from bovines and equines between 2007 and 2008, in the States of São Paulo and Minas Gerais / Caracterização genética de vírus da raiva isolado de bovinos e equinos entre 2007 e 2008, nos Estados de São Paulo e Minas Gerais

INTRODUCTION: Rabies is an acute disease of the central nervous system and is responsible for the deaths of thousands of humans, wild animals and livestock, particularly cattle, as well as causing major economic losses. This study describes the genetic characterization of rabies virus variants that circulate in Desmodus rotundus populations and are transmitted to herbivores. METHODS: Fifty rabies virus isolates from bovines and equines in the States of São Paulo and Minas Gerais, Brazil, were genetically characterized and compared with sequences retrieved from GenBank. RESULTS: Two clusters (I and II) with mean nucleotide identities of 99.1 and 97.6 percent were found. The first of these contained nearly all the samples analyzed. Lineages from other Brazilian states grouped in cluster II. CONCLUSIONS: Analysis of the amino acid sequences of the N proteins revealed the existence of genetic markers that may indicate possible variations between geographic regions, although the biologically active regions are conserved within the species over space and time.

INTRODUÇÃO: A raiva é uma doença aguda do sistema nervoso central e é responsável por mortes de milhares de humanos, animais silvestres e animais de criação - especialmente bovinos - além de causar elevadas perdas econômicas. Este trabalho descreve a caracterização genética das variantes do vírus da raiva que circulam em populações de Desmodus rotundus e são transmitidas aos herbívoros. MÉTODOS: Cinquenta isolados de vírus da raiva de bovinos e equinos provenientes dos Estados de São Paulo e Minas Gerais, Brasil, foram caracterizadas geneticamente e comparadas com sequências recuperadas do GenBank. RESULTADOS: Dois clusters, I e II, apresentando identidades médias de nucleotídeos de 99,1 e 97,6 por cento, foram obtidos, sendo o primeiro composto de quase a totalidade das amostras analisadas. Linhagens de outros estados do Brasil "clustered" no II. CONCLUSÕES: A análise das sequências de aminoácidos da proteína N revelou que existem marcadores genéticos que podem determinar uma possível regionalidade embora as regiões biologicamente ativas apresentem-se conservadas dentro das espécies ao longo do tempo e espaço.

Antigenic and genetic characterization of the first rabies virus isolated from the bat Eumops perotis in Brazil

Although the main transmitters of rabies in Brazil are dogs and vampire bats, the role of other species such as insectivorous and frugivorous bats deserves special attention, as the rabies virus has been isolated from 36 bat species. This study describes the first isolation of the rabies virus from the insectivorous bat Eumops perotis. The infected animal was found in the city of Ribeirão Preto, São Paulo. The virus was identified by immunofluorescence antibody test (FAT) in central nervous system (CNS) samples, and the isolation was carried out in N2A cell culture and adult mice. The sample was submitted to antigenic typing using a panel of monoclonal antibodies (CDC/Atlanta/USA). The DNA sequence of the nucleoprotein gene located between nucleotides 102 and 1385 was aligned with homologous sequences from GenBank using the CLUSTAL/W method, and the alignment was used to build a neighbor-joining distance-based phylogenetic tree with the K-2-P model. CNS was negative by FAT, and only one mouse died after inoculation with a suspension from the bat's CNS. Antigenic typing gave a result that was not compatible with the patterns defined by the panel. Phylogenetic analysis showed that the virus isolated segregated into the same cluster related to other viruses isolated from insectivorous bats belonging to genus Nyctinomops ssp. (98.8 percent nucleotide identity with each other).

No Brasil, embora os principais transmissores da raiva sejam cães e morcegos hematófagos, o papel de outras espécies, tais como morcegos insetívoros e frugívoros, merece atenção especial, uma vez que o vírus da raiva já foi isolado em 36 espécies de morcegos. Este estudo descreve o primeiro isolamento do vírus da raiva em um morcego insetívoro Eumops perotis. O animal infectado foi encontrado na cidade de Ribeirão Preto, São Paulo. O vírus foi identificado pelo teste de imunofluorescência direta (IFD) em amostras de sistema nervoso central (SNC), e o isolamento foi realizado em cultura de células N2A e em camundongos adultos. A amostra foi submetida à tipificação antigênica, utilizando um painel de oito anticorpos monoclonais (CDC/Atlanta/USA). A seqüência de DNA do gene da nucleoproteína, localizada entre os nucleotídeos 102 a 1385, foi alinhada com seqüências homólogas presentes no GenBank, usando o método CLUSTAL/W e o alinhamento foi utilizado para a construção da árvore filogenética de distância "neighbor-joining" com o modelo K-2-P. O SNC testado foi negativo por IFD, e somente um camundongo morreu após inoculação com a suspensão do SNC do morcego. A tipificação antigênica apresentou resultado não-compatível com os padrões definidos pelo painel. A análise filogenética mostrou que o vírus isolado segregou no mesmo grupo relacionado com outros vírus isolados de morcegos insetívoros, gênero Nyctinomops ssp. (98,8 por cento de identidade de nucleotídeos entre elas).

First report of rabies in vampire bats (Desmodus rotundus) in an urban area, Ubatuba, São Paulo state, Brazil

The purpose of this report is to record the first case of a hematophagous bat (Desmodus rotundus) infected with rabies virus in an urban area in Brazil. To the authors' knowledge, this is the first such case in Latin America. After discovering a bat in his garden at 10 o'clock in the morning, a resident of Ubatuba municipality asked the Zoonosis Control Center team to visit his home. The animal was caught alive on the same day and sent to the Pasteur Institute laboratory, where it was identified as a Desmodus rotundus specimen. Standard tests for rabies diagnosis were carried out (direct immunofluorescence and viral isolation), and the results were positive. The presence of different species of (primarily insectivorous) bats in urban areas represents a serious public health problem. This case, however, is indicative of a much greater risk because the species in question has hematophagous habits, what means this animals has a low energy reserves and, therefore, its need to feed daily.

Este relato tem por objetivo fazer o primeiro registro de morcego hematófago (Desmodus rotundus) infectado com o vírus da raiva, encontrado em área urbana de um município do Brasil e, até onde os autores têm conhecimento, na América Latina. Um munícipe de Ubatuba, São Paulo, solicitou a visita da equipe do Centro de Controle de Zoonoses em sua residência, após ter encontrado um morcego em seu quintal, às 10:00 horas da manhã. No mesmo dia o animal foi recolhido, ainda vivo, para ser encaminhado ao Laboratório do Instituto Pasteur. No Laboratório foi feita a identificação do espécime, Desmodus rotundus, e realizadas as provas clássicas para diagnóstico da raiva (Imunofluorescência Direta e Isolamento Viral), que resultaram positivas. A identificação de diferentes espécies de morcegos em áreas urbanas, predominantemente espécies insetívoras, representa um sério problema para a saúde pública. Este caso, no entanto, por tratar-se de espécie com hábitos hematofágicos, indica um risco ainda maior, tendo em vista a baixa reserva energética destes animais e a necessidade que têm de se alimentarem diariamente.

Imunopatologia da infecção rábica em camundongos geneticamente selecionados para máxima ou mínima reação inflamatória aguda / Imunopathologic in rabies in line of mice selected for high or law acute inflamatory reaction

A raiva é uma doença que apresenta sintomatologia clínica severa, além de ser altamente letal, entretanto, a resposta inflamatória é pouco evidenciada. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi analisar os mecanismos imunopatológicos que ocorrem no Sistema Nervoso Central (SNC) durante a infecção rábica, utilizando como modelo experimental, linhagens de camundongos que apresentam resposta inflamatória aguda (Acute Inflammatory Reaction) máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). Foram utilizadas duas amostras, sendo uma de morcego hematófago (V3) e uma de vírus fixo (PV1 43/4). A titulação de anticorpos anti-rábicos e isótipos IgG1 e IgG2a foi feita por meio da técnica imunoenzimática (ELISA), demonstrando um discreto aumento na produção de IgG e do isótipo IgG1 nos animais infectados da linhagem AIRmax. O período de incubação, determinado por inoculações intracerebrais de suspensões virais contendo 100DL50, foi de 6-7 dias para a amostra PV1 43/4 e de 9-10 dias para a V3. A mortalidade foi de 100% para ambas as linhagens e não houve diferença quanto à replicação viral. A análise histopatológica de encéfalos e medulas dos camundongos infectados mostrou focos inflamatórios em todas as regiões do SNC, porém, não houve diferença significativa no número de neutrófilos. Corpúsculos de Negri foram observados em praticamente todas as regiões analisadas. Os resultados sugerem que a reação inflamatória aguda não é um fator determinante na infecção pelo vírus rábico

Imunopatologia da infecção rábica em camundongos geneticamente selecionados para máxima ou mínima reação inflamatória aguda

A raiva é uma doença que apresenta sintomatologia clínica severa, além de ser altamente letal, entretanto, a resposta inflamatória é pouco evidenciada. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi analisar os mecanismos imunopatológicos que ocorrem no Sistema Nervoso Central (SNC) durante a infecção rábica, utilizando como modelo experimental, linhagens de camundongos que apresentam resposta inflamatória aguda (Acute Inflammatory Reaction) máxima (AIRmax) e mínima (AIRmin). Foram utilizadas duas amostras, sendo uma de morcego hematófago (V3) e uma de vírus fixo (PV1 43/4). A titulação de anticorpos anti-rábicos e isótipos IgG1 e IgG2a foi feita por meio da técnica imunoenzimática (ELISA), demonstrando um discreto aumento na produção de IgG e do isótipo IgG1 nos animais infectados da linhagem AIRmax. O período de incubação, determinado por inoculações intracerebrais de suspensões virais contendo 100DL50, foi de 6-7 dias para a amostra PV1 43/4 e de 9-10 dias para a V3. A mortalidade foi de 100% para ambas as linhagens e não houve diferença quanto à replicação viral. A análise histopatológica de encéfalos e medulas dos camundongos infectados mostrou focos inflamatórios em todas as regiões do SNC, porém, não houve diferença significativa no número de neutrófilos. Corpúsculos de Negri foram observados em praticamente todas as regiões analisadas. Os resultados sugerem que a reação inflamatória aguda não é um fator determinante na infecção pelo vírus rábico